應用技術 - 抗病毒技術 Anti-Viral
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奈米科技與幹細胞臨床醫學研究中心合作針對JM奈米新型複合材料對抗病毒進行以下測試:利用透明區斑點形成(Plaque Forming)方法,觀察經JM材料作用後之病毒培養液中殘留量。
病毒種類:
1.腸病毒 LLC-MK2:腸病毒伊科十一型,來自於美國病理學會能力試驗病毒株。
2.流感A型病毒 MDCK:A型流行性感冒病毒New Caledonia/20/99 (H1N1),來自於美國病理學會能力試驗病毒株。
宿主細胞:
1.A型流行性感冒病毒使用MDCK細胞株(BCRC 60004)。
2.腸病毒使用LLC-MK2細胞株(BCRC 60092)。
病毒種類:
1.腸病毒 LLC-MK2:腸病毒伊科十一型,來自於美國病理學會能力試驗病毒株。
2.流感A型病毒 MDCK:A型流行性感冒病毒New Caledonia/20/99 (H1N1),來自於美國病理學會能力試驗病毒株。
宿主細胞:
1.A型流行性感冒病毒使用MDCK細胞株(BCRC 60004)。
2.腸病毒使用LLC-MK2細胞株(BCRC 60092)。
JM奈米新型複合材料TTA抗病毒測試
本測試病毒種類分別為腸病毒與流感A型病毒,當細胞受到病毒感染後,細胞會死亡(如下圖所示),再利用MTT結晶染色方式測試細胞酵素活性對受質之作用效果,以此分析細胞存活率用以判斷抗病毒之效果,當測試材料對於抗病毒之效用越高時,其細胞存活率越高,而由於病毒與細菌不同無法直接量測,因此用細胞感染形成病毒斑(Plaque)之方法,計算病毒斑形成單位(PFU; Plaque-forming unit)為病毒濃度之判斷,其單位為PFU/Ml。
由上圖可清楚看出當細胞受到病毒感染死亡後,藉由MTT結晶染色方式可看出活體細胞與死亡細胞的差異。
以下先針對未添加任何材料之情況下,接種不同病毒時細胞存活率測試。
以上抗病毒測試,皆依照美國FDA認證之實驗室MICROBIOTEST針對抗病毒所使用之認證規範ASTM E 1052-96,依此方法與幹細胞臨牀醫學研究中心合作進行測試並計算出病毒抑制能力=抑制病毒量÷接種病毒量。
1.以2×106 PFU/mL病毒濃度測試,JM材料有抑制腸病毒感染LLC-MK2細胞效果,抑制能力達99.99%。
2.以4×103 PFU/mL病毒濃度測試,JM材料有抑制A型病毒病毒感染MDCK細胞效果,抑制能力達99.99% 。
1.以2×106 PFU/mL病毒濃度測試,JM材料有抑制腸病毒感染LLC-MK2細胞效果,抑制能力達99.99%。
2.以4×103 PFU/mL病毒濃度測試,JM材料有抑制A型病毒病毒感染MDCK細胞效果,抑制能力達99.99% 。